Забор материала для пцр алгоритм

Правила забора проб клинического материала для ПЦР-тестирования на COVID–19

Важным условием получения достоверного результата исследования методом ПЦР на COVID–19 является правильный забор, хранение и своевременная доставка клинического материала в лабораторию.

Входными воротами для вируса SARS-CoV-2 являются верхние дыхательные пути. После попадания на слизистые носоглотки и ротоглотки вирус начинает размножаться в эпителиальных клетках. Поэтому в конце инкубационного периода и в первые дни клинических проявлений наиболее информативными являются мазки именно из этих областей.

Все процедуры по забору клинического материала выполняет медработник с использованием средств индивидуальной защиты.

1. Мазки берут двумя сухими стерильными зондами. Для этого используют пластиковые зонды с синтетическим тампоном. Нельзя пользоваться зондом на деревянной основе с хлопковым тампоном, так как его применение может ингибировать реакцию и привести к ложноотрицательным результатам.
2. Первый зонд вводят поочередно в обе полости носа пациента на глубину 2 см. Затем его направляют слегка вниз и вводят его в нижний носовой ход, прижимают наружную стенку носа и вращательным движением тщательно снимают слущенный эпителий. Вторым зондом берут мазок с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, не касаясь корня языка.
3. Мазок из носоглотки и мазок из ротоглотки помещают в одну пробирку с транспортной средой для большей концентрации вируса.
4. Свободные концы зондов отламывают и герметично закрывают пробирку.

Взятый материал в течение 1-4 часов доставляют в лабораторию с соблюдением холодовой цепи. Допускается хранение биологического материала в течение 24 ч при температуре 2–8°С, более длительно – при температуре не выше минус 20° С. При нарушении сроков хранения и условий транспортировки генетический материал возбудителя может разрушаться, что приведет к ложноотрицательным результатам.

Достоверность результата ПЦР-теста зависит не только от соблюдения правил забора, но и от правильной подготовки к сдаче мазков со стороны пациента:

• мазок необходимо сдавать натощак или не ранее чем через 3 часа после последнего приёма воды и пищи;
• за 3 часа до взятия мазка нельзя курить, чистить зубы, использовать спрей-освежитель для ротовой полости или жевательную резинку;
• не менее чем за 3 часа до взятия мазка нельзя использовать лекарственные средства местного применения (капли, спреи, мази, рассасывающиеся таблетки, леденцы или пастилки).

Что будет, если есть или пить перед сдачей мазков для ПЦР-теста?

Коронавирус SARS-Cov-2 живет внутри эпителиальных клеток. Для ПЦР-исследования важно получить мазок с достаточным количеством инфицированных клеток. В момент проглатывания еды эпителиальные клетки механически слущиваются пищевым комком с поверхности слизистой оболочки. Если взять мазок сразу после еды, в пробирку может попасть недостаточное количество инфицированных клеток. В этом случае пациент может получить ложноотрицательный результат. То же касается питья. Вода смывает с поверхности миндалин, задней стенки глотки инфицированные клетки.

Можно ли пользоваться лекарственными средствами для носа и горла (капли, спреи, антисептики) перед сдачей мазков?

Перед взятием мазков нельзя использовать лекарственные средства для местного применения (капли, спреи и др). После их применения количество вируса на слизистой снижается и увеличивается вероятность получения ложноотрицательных результатов ПЦР-теста.

Почему нельзя чистить зубы перед сдачей ПЦР-теста?

Применение любых очищающих средств для полости рта снижает количество вируса в получаемом мазке. Зубная паста может содержать антисептические компоненты. Попадание ее остатков в пробирку с мазком может ингибировать реакцию, что приведет к недостоверным результатам.

О.А. Колесникова, биолог лаборатории вирусологических исследований и диагностики ВИЧ/СПИД

Источник

Рекомендации по взятию клинического материала на респираторные инфекции, его хранению и транспортированию методом ПЦР.

Для проведения анализа используется следующий клинический материал:

— мазки из полости носа и ротоглотки;
— мокрота (либо аспираты из носоглотки и трахеи);

Материалы для взятия клинического материала:

Взятие мазков из полости носа

Мазки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами.
Если полость носа заполнена слизью перед процедурой рекомендуется провести высмаркивание. Зонд с ватным тампоном вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа.
После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

Взятие мазков из ротоглотки

Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой.
После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков. Конец зонда отламывают или отрезают, с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают.

ВНИМАНИЕ! Рекомендуется совмещать мазки из полости носа и ротоглотки в одной пробирке. Для этого рабочие концы зондов после взятия мазков у пациента помещаются в одну пробирку с 500 мкл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков и исследуются как один образец.

Мокрота или аспират из носоглотки или трахеи

Мокроту собирают в стерильные одноразовые контейнеры, после предварительного полоскания полости рта водой. Аспираты из носоглотки и трахеи получают традиционным способом и помещают в стерильные одноразовые контейнеры.

Хранение клинических образцов до проведения анализа

Допускается хранение взятых образцов до проведения исследования в течение 1 сут при температуре от 2 до 8 °С или 1 нед – при температуре не выше минус 16 °С.

Условия транспортирования: при температуре +4+8 °С.

Исследование клинического материала на наличие ДНК возбудителей ИППП и других инфекций органов репродукции методом ПЦР

ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА

Для проведения анализа, как правило, используются следующие виды клинического материала:

• У женщин: соскобное отделяемое слизистых оболочек цервикального канала, влагалища, уретры; моча.

• У мужчин: соскобное отделяемое слизистой оболочки уретры, моча, секрет предстательной железы.

• У детей: моча, отделяемое конъюнктивы глаз.

Взятие клинического материала должно производиться в пробирки с транспортной средой, рекомендованной ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.
Полученные образцы (кроме образцов мочи) можно транспортировать и хранить в следующих режимах:

при комнатной температуре – в течение 48 часов;
при температуре от 2 до 8 °С – в течение двух недель;
при температуре не выше минус 20 °С – в течение месяца;
при температуре не выше минус 68 °С – длительно.

Полученные образцы, помещенные в транспортную среду с муколитиком (ТСМ), можно транспортировать и хранить:

при комнатной температуре (от 18 до 25 °С) до 28 суток;
при температуре от 2 до 8 °С до 3 месяцев;
при температуре не выше минус 20 °С – длительно.

Допускается однократное замораживание-оттаивание клинических образцов.
Полученные образцы мочи можно транспортировать и хранить:

при комнатной температуре – в течение 6 часов;
при температуре от 2 до 8 °С – в течение суток;

Доставка клинических образцов осуществляется в специальном контейнере с охлаждающими элементами.

Для проведения исследования на наличие ДНК определенного микроорганизма анализируются следующие виды клинического материала:

— для выявления ДНК Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, Ureaplasma spp.,U.parvum / U.urealyticum, Mycoplasma hominis–соскобное отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта, образцы мочи, секрет предстательной железы человека.

— для выявления ДНК Chlamydia trachomatisи Neisseria gonorrhoeae возможно также исследовать отделяемое конъюнктивы глаз, соскобное отделяемое слизистых оболочек прямой кишки, ротоглотки.

для выявления ДНК HSVI и II типов, Treponema pallidum– соскобное отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта, прямой кишки, ротовой полости, отделяемое везикул (пузырьковых высыпаний) и эрозивно-язвенных поражений кожи и слизистых оболочек.

для выявления ДНК HSVI и II типов можно также исследовать цельную кровь и ликвор, отделяемое конъюнктивы глаз.

для выявления ДНК CMV – соскобное отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта, моча, слюна и цельная кровь.

для выявления ДНКCandida albicans– соскобное отделяемое слизистых оболочек урогенитального тракта, ротовой полости; моча.

для выявления ДНКGardnerella vaginalis– соскобное отделяемое слизистой оболочки влагалища.

Источник

Забор материала для пцр алгоритм

Порядок забора биоматериала для микроскопического исследования

• Манипуляция проводится стоя или лежа; если переносимость процедуры плохая, пациента следует уложить (усаживать не нужно).
• Промаркировать предметное стекло (наклеить на него штрих-код).
• Попросить пациента оголить головку полового члена путем сдвигания крайней плоти.
• Обработать головку полового члена в области наружного отверстия уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.
• При наличии свободно стекающих из уретры выделений удалить их сухим тампоном.
• Ввести зонд (тип А) в уретру на глубину 3–4 см (Рисунок 22).

• Несколькими осторожными вращательными движениями в течении 3–5 секунд произвести забор биоматериала (Рисунок 23).
• Вынуть зонд из уретры.
• Биоматериал, взятый с помощью зонда, нанести на предметное стекло. Материал наносится на стекло мягкими движениями, равномерно. Неправильным является нанесение материала толстым слоем, каплей, небольшим мазком.
• Высушить предметное стекло на воздухе при комнатной температуре в течение 30 минут.
• Стекло поместить в пластиковый контейнер с вентиляцией.

Порядок забора биоматериала для исследований методом ПЦР, для посева на урогенитальные инфекции

• Манипуляция проводится стоя или лежа; если переносимость процедуры плохая, пациента следует уложить (усаживать не нужно).
• Выбрать соответствующий контейнер для забора биоматериала. Для исследований методом ПЦР — флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф»). Для посевов выбрать контейнер в соответствии с Таблицей 10.
• Промаркировать контейнер (наклеить на него штрих-код).
• Попросить пациента оголить головку полового члена путем сдвигания крайней плоти.
• Обработать головку полового члена в области наружного отверстия уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.
• При наличии свободно стекающих из уретры выделений удалить их сухим тампоном.
• Ввести зонд (тип А) в уретру на глубину 3–4 см (Рисунок 22).
• Несколькими осторожными вращательными движениями в течении 3–5 секунд произвести забор биоматериала (Рисунок 23).
• Вынуть зонд из уретры.
• Перенести зонд во флакон/микропробирку со средой.
• Погрузив рабочую часть зонда, вращать зонд в течение 10 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, отжать избыток жидкости, прижимая к стенке флакона/микропробирки, удалить зонд.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе/микропробирке!
• Закрыть флакон/микропробирку.
• Поместить флакон/микропробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Порядок забора биоматериала для посева на микробиологические исследования

• Манипуляция проводится стоя или лежа; если переносимость процедуры плохая, пациента следует уложить (усаживать не нужно).
• Выбрать соответствующий контейнер для забора биоматериала в соответствии с Таблицей 10.
• Открыть упаковку с транспортной средой и зондом, отклеив липкий слой сверху (Рисунок 24).

• Промаркировать транспортную пробирку со средой (наклеить на нее штрих-код).
• Попросить пациента оголить головку полового члена путем сдвигания крайней плоти.
• Обработать головку полового члена в области наружного отверстия уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором.
• При наличии свободно стекающих из уретры выделений удалить их сухим тампоном.
• Снять крышку с транспортной пробирки со средой (Рисунок 25).
• Достать зонд (Рисунок 26).

• Ввести зонд в уретру на глубину 3–4 см (Рисунок 22).
• Несколькими осторожными вращательными движениями в течении 3–5 секунд произвести забор биоматериала (Рисунок 23).
• Вынуть зонд из уретры.
• Поместить зонд в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку (Рисунок 27).
• Поместить транспортную пробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов биоматериала из урогенитального тракта у женщин

Порядок забора биоматериала для микроскопического исследования

• Узнать у пациентки живет ли она половой жизнью (жила раньше?)
• Узнать у пациентки рожала она или нет, для того, чтобы выбрать необходимый размер зеркала. Если пациентка не рожала, необходимо выбрать зеркало «S». Если пациентка рожала, необходимо выбрать зеркало «М».
• Промаркировать предметное стекло (наклеить на него штрих-код).
• Забор биоматериала производится с трех участков: наружное отверстие цервикального канала (C), задний свод влагалища (V), наружное отверстие мочеиспускательного канала (U). Подписать предметное стекло в направлении слева направо водостойким маркером (Рисунок 28).

• Ввести гинекологическое зеркало (зеркало Куско).
• Установить зеркало в положение, при котором наиболее четко возможно осмотреть шейку матки, задний свод влагалища (обнажить шейку в зеркалах).
• Избыток слизи и обильных выделений удалить с помощью пинцета стерильным тампоном.
• Ввести урогенитальный зонд 1 (тип А) в цервикальный канал на глубину 1–2 см, собрать материал осторожными вращательными движениями в течение 3–5 секунд (Рисунок 29).

• Нанести мазок на предметное стекло слева. Материал наносится на стекло мягкими движениями, равномерно. Неправильным является нанесение материала толстым слоем, каплей, небольшим мазком.
• Провести урогенитальным зондом 2 (тип А) по поверхности слизистой влагалища в области заднего свода (Рисунок 30).
• Нанести мазок в центре предметного стекла. Материал наносится на стекло мягкими движениями, равномерно. Неправильным является нанесение материала толстым слоем, каплей, небольшим мазком.
• Извлечь гинекологическое зеркало.
• Ввести урогенитальный зонд 3 (тип А) в уретру на глубину 1–1.5 см, аккуратно, не поранив слизистую, несколькими вращательными движениями произвести соскоб эпителиальных клеток.
• Нанести мазок на предметное стекло справа. Материал наносится на стекло мягкими движениями, равномерно. Неправильным является нанесение материала толстым слоем, каплей, небольшим мазком.
• Высушить предметное стекло на воздухе при комнатной температуре в течение 30 минут.
• Стекло поместить в пластиковый контейнер с вентиляцией.

Порядок забора биоматериала для исследований методом ПЦР, для посева на урогенитальные инфекции

• Узнать у пациентки живет ли она половой жизнью (жила раньше?)
• Узнать у пациентки рожала она или нет, для того, чтобы выбрать необходимый размер зеркала. Если пациентка не рожала, необходимо выбрать зеркало «S». Если пациентка рожала, необходимо выбрать зеркало «М».
• Выбрать соответствующий контейнер для забора биоматериала. Для исследований методом ПЦР — флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф»). Для посевов выбрать контейнер в соответствии с Таблицей 10.
• Промаркировать контейнер (наклеить на него штрих-код).
• Ввести гинекологическое зеркало (зеркало Куско).
• Установить зеркало в положение, при котором наиболее четко возможно осмотреть шейку матки, задний свод влагалища (обнажить шейку в зеркалах).
• Избыток слизи и обильных выделений удалить с помощью пинцета стерильным тампоном.
• Ввести урогенитальный зонд 1 (тип А) в цервикальный канал на глубину 1–2 см, собрать материал осторожными вращательными движениями в течение 3–5 секунд (Рисунок 29).
• Вынуть зонд и перенести его во флакон/микропробирку со средой.
• Погрузив рабочую часть зонда, вращать зонд в течение 10 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, отжать избыток жидкости, прижимая к стенке флакона/микропробирки, удалить зонд.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе/микропробирке!
• Провести урогенитальным зондом 2 (тип А) по поверхности слизистой влагалища в области заднего свода (Рисунок 30).
• Перенести зонд в тот же флакон/микропробирку со средой.
• Погрузив рабочую часть зонда, вращать зонд в течение 10 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, отжать избыток жидкости, прижимая к стенке флакона/микропробирки, удалить зонд.
• Извлечь гинекологическое зеркало.
• Ввести урогенитальный зонд 3 (тип А) в уретру на глубину 1–1.5 см, аккуратно, не поранив слизистую, несколькими вращательными движениями произвести соскоб эпителиальных клеток.
• Перенести зонд в тот же флакон/микропробирку со средой.
• Погрузив рабочую часть зонда, вращать зонд в течение 10 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, отжать избыток жидкости, прижимая к стенке флакона/микропробирки, удалить зонд.
• Закрыть флакон/микропробирку.
• Поместить флакон/микропробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Порядок забора биоматериала для посева на микробиологические исследования

• Узнать у пациентки живет ли она половой жизнью (жила раньше?)
• Узнать у пациентки рожала она или нет, для того, чтобы выбрать необходимый размер зеркала. Если пациентка не рожала, необходимо выбрать зеркало «S». Если пациентка рожала, необходимо выбрать зеркало «М».
• Выбрать соответствующий контейнер для забора биоматериала в соответствии с Таблицей 10.
• Открыть упаковку с транспортной средой и зондом, отклеив липкий слой сверху (Рисунок 24).
• Промаркировать транспортную пробирку со средой (наклеить на нее штрих-код).
• Ввести гинекологическое зеркало (зеркало Куско).
• Установить зеркало в положение, при котором наиболее четко возможно осмотреть шейку матки, задний свод влагалища (обнажить шейку в зеркалах).
• Избыток слизи и обильных выделений удалить с помощью пинцета стерильным тампоном.
• Снять крышку с транспортной пробирки со средой (Рисунок 25).
• Достать зонд (Рисунок 26).
• Провести зондом по поверхности слизистой влагалища в области заднего свода (Рисунок 30).
• Вынуть зонд.
• Поместить зонд в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку (Рисунок 27).
• Извлечь гинекологическое зеркало.
• Поместить транспортную пробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов биоматериала для исследования на энтеробиоз

Порядок забора биоматериала

• Промаркировать предметное стекло (наклеить на него штрих-код).
• Предложить обследуемому лечь на бок, привести колени к животу, раздвинуть ягодицы.
• Собрать соскоб с перианальных складок вокруг ануса методом «отпечатка» в нескольких местах липкой лентой длиной 5 см.
• После получения отпечатка аккуратно наклеить липкую ленту на предметное стекло клейкой стороной вниз.
• Стекло поместить в пластиковый контейнер с вентиляцией.
• Хранение и транспортировка контейнера производятся при комнатной температуре.

Инструкция по получению и обработке ректальных мазков

Порядок забора биоматериала для исследований методом ПЦР

• Промаркировать флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф») (наклеить на него штрих-код).
• Предложить обследуемому лечь на бок, привести колени к животу, раздвинуть ягодицы.
• Открыть упаковку со стерильным зондом (тип А).
• Ввести зонд в задний проход на глубину 4–5 см.
• Аккуратно вращать зонд вокруг оси, собирая материал.
• Осторожно извлечь зонд.
• Перенести зонд во флакон с транспортной средой.
• Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращать зонд в течение 3–5 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, прижимая его к стенке флакона и, отжав избыток жидкости, удалить зонд и закрыть флакон.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе!
• Поместить флакон в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Порядок забора биоматериала для микробиологических исследований

• Выбрать соответствующий контейнер для забора биоматериала в соответствии с Таблицей 10.
• Открыть упаковку с транспортной средой и зондом, отклеив липкий слой сверху (Рисунок 24).
• Промаркировать транспортную пробирку со средой (наклеить на нее штрих-код).
• Предложить обследуемому лечь на бок, привести колени к животу, раздвинуть ягодицы.
• Снять крышку с транспортной пробирки со средой (Рисунок 25), достать зонд (Рисунок 26).
• Ввести зонд в задний проход на глубину 4–5 см.
• Аккуратно вращать зонд вокруг оси, собирая материал.
• Осторожно извлечь зонд.
• Поместить зонд в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку (Рисунок 27).
• Поместить транспортную пробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов секрета предстательной железы

Забор материала для исследования выполняется врачом-урологом после проведения массажа простаты.

Порядок забора секрета предстательной железы для исследований методом ПЦР

• Промаркировать флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф») (наклеить на него штрих-код).
• После проведения массажа простаты осуществить забор материала из уретры с помощью урогенитального зонда.
• Погрузить рабочую часть зонда во флакон со средой.
• Вращать зонд в течение 10 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, отжать избыток жидкости, прижимая к стенке флакона, удалить зонд и закрыть флакон.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе!
• Хранить и транспортировать флакон с образцом при температуре +2…+8 °С.

Порядок забора секрета предстательной железы для микробиологических исследований

• Выбрать контейнер в соответствии с Таблицей 10.
• Промаркировать контейнер (наклеить на него штрих-код).
• После проведения массажа простаты осуществить забор материала из уретры с помощью урогенитального зонда.
• Поместить зонд в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку.
• Хранить и транспортировать транспортную пробирку при температуре +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов биоматериала из носа

Порядок забора биоматериала для исследований методом ПЦР

• Промаркировать флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф») (наклеить на него штрих-код).
• Открыть упаковку со стерильным зондом (тип А).
• Попросить пациента запрокинуть голову, постараться не двигаться во время произведения забора биоматериала.
• Ввести зонд последовательно в правую и левую ноздрю и вращательными движениями собрать материал с крыльев носа и верхнего угла носового отверстия (Рисунок 31).

• При наличии в полости носа очагов воспаления или изъязвления собрать материал из очагов.
• Перенести зонд во флакон с транспортной средой.
• Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращать зонд в течение 3–5 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, прижимая его к стенке флакона и, отжав избыток жидкости, удалить зонд и закрыть флакон.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе!
• Поместить флакон в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Порядок забора биоматериала для микробиологических исследований

• Выбрать контейнер в соответствии с Таблицей 10.
• Открыть упаковку с транспортной средой и зондом, отклеив липкий слой сверху (Рисунок 24).
• Промаркировать транспортную пробирку со средой (наклеить на нее штрих-код).
• Попросить пациента запрокинуть голову, постараться не двигаться во время произведения забора биоматериала.
• Снять крышку с транспортной пробирки со средой (Рисунок 25).
• Достать зонд (Рисунок 26).
• Ввести зонд последовательно в правую и левую ноздрю и вращательными движениями собрать материал с крыльев носа и верхнего угла носового отверстия (Рисунок 31).
• При наличии в полости носа очагов воспаления или изъязвления собрать материал из очагов.
• Вынуть зонд и поместить его в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку (Рисунок 27).
• Поместить транспортную пробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов биоматериала из ротоглотки

Порядок забора биоматериала для исследований методом ПЦР

• Промаркировать флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф») (наклеить на него штрих-код).
• Открыть упаковку со стерильным зондом (тип А).
• Попросить пациента запрокинуть голову, постараться не двигаться во время произведения забора биоматериала.
• Взять зонд в правую руку, в левую взять шпатель.
• Прижать язык пациента к нижней части ротовой полости шпателем.
• Собрать материал, поочередно обрабатывая зондом правую миндалину, правую небную дужку, левую миндалину, левую небную дужку, язычок, на уровне язычка коснуться зондом задней стенки глотки (Рисунок 32).

• При наличии в полости носа очагов воспаления или изъязвления собрать материал из очагов.
• Перенести зонд во флакон с транспортной средой.
• Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращать зонд в течение 3–5 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, прижимая его к стенке флакона и, отжав избыток жидкости, удалить зонд и закрыть флакон.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе!
• Поместить флакон в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Порядок забора биоматериала для микробиологических исследований

Для исследования на дифтерию забор биоматериала осуществляется из зева и носа!
Не допускается собирать материал из ротоглотки при воспаленном надгортаннике, так как проведение процедуры может привести к серьезной респираторной обструкции.
При взятии пробы нельзя касаться тампоном слизистых щек, языка, десен, губ.

• Выбрать контейнер в соответствии с Таблицей 10.
• Открыть упаковку с транспортной средой и зондом, отклеив липкий слой сверху (Рисунок 24).
• Промаркировать транспортную пробирку со средой (наклеить на нее штрих-код).
• Попросить пациента запрокинуть голову, постараться не двигаться во время произведения забора биоматериала.
• Снять крышку с транспортной пробирки со средой (Рисунок 25).
• Достать зонд (Рисунок 26).
• Взять зонд в правую руку, в левую взять шпатель.
• Прижать язык пациента к нижней части ротовой полости шпателем.
• Собрать материал, поочередно обрабатывая тампоном правую миндалину, правую небную дужку, левую миндалину, левую небную дужку, язычок, на уровне язычка коснуться зондом задней стенки глотки (Рисунок 32).
• При наличии в полости носа очагов воспаления или изъязвления собрать материал из очагов.
• Вынуть зонд и поместить его в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку (Рисунок 27).
• Поместить транспортную пробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов биоматериала с конъюнктивы

Порядок забора биоматериала для исследований методом ПЦР

• Промаркировать флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф») (наклеить на него штрих-код).
• Открыть упаковку со стерильным зондом (тип А).
• Попросить пациента запрокинуть голову, постараться не двигаться во время произведения забора биоматериала.
• Большим пальцем левой руки опустить нижнее веко одного из глаз, одновременно приподнимая указательным пальцем верхнее веко того же глаза, максимально обнажая конъюнктиву.
• Стерильным зондом, находящимся в правой руке, сделать 2–3 круговых движения по конъюнктиве глаза, не касаясь им ресниц (Рисунок 33).

• Перенести зонд во флакон с транспортной средой.
• Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращать зонд в течение 3–5 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, прижимая его к стенке флакона и, отжав избыток жидкости, удалить зонд и закрыть флакон.
  Не допускается оставлять наконечник зонда во флаконе!
• Поместить флакон в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Порядок забора биоматериала для микробиологических исследований

• Выбрать контейнер в соответствии с Таблицей 10.
• Открыть упаковку с транспортной средой и зондом, отклеив липкий слой сверху (Рисунок 24).
• Промаркировать транспортную пробирку со средой (наклеить на нее штрих-код).
• Попросить пациента запрокинуть голову, постараться не двигаться во время произведения забора биоматериала.
• Снять крышку с транспортной пробирки со средой (Рисунок 25), достать зонд (Рисунок 26).
• Большим пальцем левой руки опустить нижнее веко одного из глаз, одновременно приподнимая указательным пальцем верхнее веко того же глаза, максимально обнажая конъюнктиву.
• Стерильным зондом, находящимся в правой руке сделать 2–3 круговых движения по конъюнктиве глаза, не касаясь им ресниц (Рисунок 33).
• Вынуть зонд и поместить его в транспортную пробирку со средой, плотно закрыв крышку (Рисунок 27).
• Поместить транспортную пробирку в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов буккального (щечного) эпителия

Порядок забора биоматериала

• Подготовить флакон с транспортной средой ПЦР («Эппендорф») и два стерильных зонда (тип А) (или любой другой аналогичный образец).
• Промаркировать флакон (наклеить на него штрих-код).
• Вскрыть стерильную упаковку первого зонда.
• Попросить пациента запрокинуть голову, открыть рот и постараться не двигаться во время процедуры забора.
• Ввести зонд в полость рта в щечно-десневой карман (в этом месте скапливается большое количество слущенного эпителия), слегка прижать его рукой снаружи, зажав между щекой и десной (Рисунок 34).

• Возвратно-поступательными движениями, вращая зонд пол-оборота вправо, пол-оборота влево провести несколько раз (не менее 5), собирая клетки внутреннего эпителия.
• Вывести зонд из полости рта и перенести его во флакон.
• Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду, вращать зонд в течение 10 секунд, избегая разбрызгивания раствора.
• Вынуть зонд из раствора, прижимая его к стенке флакона и, отжав избыток жидкости, удалить зонд.
• Вскрыть стерильную упаковку второго зонда и повторить процедуру забора для другой щеки, собирая материал в тот же флакон.
• Плотно закрыть флакон.
• Поместить флакон в холодильник с температурой +2…+8 °С.

Инструкция по получению и обработке образцов ресниц

Забор материала для исследования ресниц производится только лечащим врачом-офтальмологом!

Порядок сбора ресниц для микроскопического исследования на наличие клещей рода Demodex

• Промаркировать предметное стекло (наклеить на него штрих-код).
• Капнуть на предметное стекло 1 каплю глицерина.
• Погрузить в каплю 6 ресниц из предполагаемого очага воспаления.
• Накрыть препарат покровным стеклом.
• Поместить предметное стекло в пластиковый контейнер с вентиляцией.
• Контейнер хранить и транспортировать при температуре +2…+8 °С.

• Промаркировать микропробирку типа «Эппендорф» (наклеить на нее штрих-код).
• Накапать в микропробирку 1–2 капли глицерина.
• Поместить в глицерин на дно микропробирки 6 ресниц из предполагаемого очага воспаления.
• Плотно закрыть крышку микропробирки.
• Микропробирку хранить и транспортировать при температуре +2…+8 °С.

Протоколы получения и обработки образцов биологического материала для цитологических исследований

Инструкция по получению и обработке мазков (соскобов) с поверхности шейки матки (наружного маточного зева) и цервикального канала на атипию

Порядок забора биоматериала

Не допускается взятие мазков после обработки шейки матки раствором уксусной кислоты или Люголя, так как полученный материал будет содержать только лизированные клетки и станет непригоден для исследования!

• Материал из шейки матки должен брать врач-гинеколог специальными цитощетками.
• Узнать у пациентки живет ли она половой жизнью (жила раньше?)
• Узнать у пациентки рожала она или нет, для того, чтобы выбрать необходимый размер зеркала. Если пациентка не рожала, необходимо выбрать зеркало «S». Если пациентка рожала, необходимо выбрать зеркало «М».
• Промаркировать два предметных стекла (наклеить на них штрих-коды).
• Ввести гинекологическое зеркало (зеркало Куско).
• Шейку матки обнажить в зеркалах, никаких манипуляций с ней не проводить: ничем не смазывать, слизь не удалять.
• Щетку бережно ввести в наружный зев шейки матки, осторожно направляя центральную часть щетки по оси цервикального канала.
• Наконечник щетки повернуть трижды на 360° по часовой стрелке и дважды на 360° против часовой стрелки, достигая тем самым взятия достаточного количества клеток с эктоцервикса и зоны трансформации.
• Щетку вывести сразу! Однократно провести одной стороной щетки по поверхности первого предметного стекла, второй стороной щетки — однократно по поверхности второго предметного стекла. Материал наносится на стекла мягкими движениями, равномерно. Неправильным является нанесение материала толстым слоем, каплей, небольшим мазком.
• Извлечь гинекологическое зеркало.
• Высушить предметные стекла на воздухе при комнатной температуре. Ничем не фиксировать!
• Стекла поместить в пластиковый контейнер с вентиляцией.

Источник