Забор материала при пцр исследованиях

Правила забора проб клинического материала для ПЦР-тестирования на COVID–19

Важным условием получения достоверного результата исследования методом ПЦР на COVID–19 является правильный забор, хранение и своевременная доставка клинического материала в лабораторию.

Входными воротами для вируса SARS-CoV-2 являются верхние дыхательные пути. После попадания на слизистые носоглотки и ротоглотки вирус начинает размножаться в эпителиальных клетках. Поэтому в конце инкубационного периода и в первые дни клинических проявлений наиболее информативными являются мазки именно из этих областей.

Все процедуры по забору клинического материала выполняет медработник с использованием средств индивидуальной защиты.

1. Мазки берут двумя сухими стерильными зондами. Для этого используют пластиковые зонды с синтетическим тампоном. Нельзя пользоваться зондом на деревянной основе с хлопковым тампоном, так как его применение может ингибировать реакцию и привести к ложноотрицательным результатам.
2. Первый зонд вводят поочередно в обе полости носа пациента на глубину 2 см. Затем его направляют слегка вниз и вводят его в нижний носовой ход, прижимают наружную стенку носа и вращательным движением тщательно снимают слущенный эпителий. Вторым зондом берут мазок с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, не касаясь корня языка.
3. Мазок из носоглотки и мазок из ротоглотки помещают в одну пробирку с транспортной средой для большей концентрации вируса.
4. Свободные концы зондов отламывают и герметично закрывают пробирку.

Взятый материал в течение 1-4 часов доставляют в лабораторию с соблюдением холодовой цепи. Допускается хранение биологического материала в течение 24 ч при температуре 2–8°С, более длительно – при температуре не выше минус 20° С. При нарушении сроков хранения и условий транспортировки генетический материал возбудителя может разрушаться, что приведет к ложноотрицательным результатам.

Достоверность результата ПЦР-теста зависит не только от соблюдения правил забора, но и от правильной подготовки к сдаче мазков со стороны пациента:

• мазок необходимо сдавать натощак или не ранее чем через 3 часа после последнего приёма воды и пищи;
• за 3 часа до взятия мазка нельзя курить, чистить зубы, использовать спрей-освежитель для ротовой полости или жевательную резинку;
• не менее чем за 3 часа до взятия мазка нельзя использовать лекарственные средства местного применения (капли, спреи, мази, рассасывающиеся таблетки, леденцы или пастилки).

Что будет, если есть или пить перед сдачей мазков для ПЦР-теста?

Коронавирус SARS-Cov-2 живет внутри эпителиальных клеток. Для ПЦР-исследования важно получить мазок с достаточным количеством инфицированных клеток. В момент проглатывания еды эпителиальные клетки механически слущиваются пищевым комком с поверхности слизистой оболочки. Если взять мазок сразу после еды, в пробирку может попасть недостаточное количество инфицированных клеток. В этом случае пациент может получить ложноотрицательный результат. То же касается питья. Вода смывает с поверхности миндалин, задней стенки глотки инфицированные клетки.

Можно ли пользоваться лекарственными средствами для носа и горла (капли, спреи, антисептики) перед сдачей мазков?

Перед взятием мазков нельзя использовать лекарственные средства для местного применения (капли, спреи и др). После их применения количество вируса на слизистой снижается и увеличивается вероятность получения ложноотрицательных результатов ПЦР-теста.

Почему нельзя чистить зубы перед сдачей ПЦР-теста?

Применение любых очищающих средств для полости рта снижает количество вируса в получаемом мазке. Зубная паста может содержать антисептические компоненты. Попадание ее остатков в пробирку с мазком может ингибировать реакцию, что приведет к недостоверным результатам.

О.А. Колесникова, биолог лаборатории вирусологических исследований и диагностики ВИЧ/СПИД

Источник

ПЦР для диагностики ИППП: какие инфекции выявляет анализ на ЗППП?

ПЦР на ИППП – это специальный метод исследования различных биологических жидкостей на предмет наличия в организме венерических заболеваний. Изобретение такой диагностики позволило выявлять скрытые формы ЗППП в самой начальной стадии.

Что такое ПЦР на ИППП

ПЦР (полимеразная цепная реакция) на ИППП – это анализ, который позволяет выявить 12 самых распространённых инфекционных заболеваний, передающихся половым путем.

Показания к назначению ПЦР на ЗППП

Показания к назначению ПЦР на ИППП:

• высыпания в области половых органов;
• боль во время мочеиспускания;
• зуд или жжение;
• обильные выделения с резким и неприятным запахом;
• эрозии на слизистой или в области гениталий;
• видоизменение (разрастание эпителия) слизистой в области шейки матки;
• воспаление мочеполовой системы;
• изменение цвета семенной жидкости у мужчин;
• увеличение лимфатических узлов в области паха;
• нарушение менструального цикла;
• случаи выкидышей, патологий при беременности, трудности с зачатием;
• наличие кисты на яичниках;
• наличие спаек в области малого таза;
• боли внизу живота;
• наличие простатита у мужчин.

Следует отметить, что вне зависимости от симптомов, проходить обследование должны все в случаях:

• незащищенного полового акта с двумя или более партнёрами в течение 6 месяцев;
• планирование беременности.

Преимущества и недостатки метода

1. Высокий процент достоверности. Даже если в биоматериале была обнаружена единичная клетка возбудителя, диагностика её выявит.
2. Оперативность получения результата.
3. Универсальность исследования. ПЦР на ИППП можно выполнять при взятии любого материала: мазок из влагалища или уретры, кровь, сперма.
4. Специфичность процедуры. Во время анализа находят специфичный фрагмент ДНК, который принадлежит конкретному вирусу.
5. Доступность. Проводят такие обследования практически все лаборатории.
6. Достаточно одной пробы, чтобы определить наличие или отсутствие ИППП.

Есть и недостатки в проведении процедуры, которые необходимо учитывать, прежде чем сдавать анализ:

1. Вероятность ложного результата. Её процент очень низкий, но все же возможен.
2. Возможность микроорганизмов мутировать структуру ДНК. В таком случае выявить болезнь будет сложно. Это редкость, но стоит учитывать этот фактор при обследовании.
3. Некоторых возбудителей сложно выявлять. Например, хламидиоз или трихомоноз. Чтобы результат был точным, приходится прибегать к стимуляции. Такие инфекции называют скрытыми.

Какие заболевания можно выявить с помощью ПЦР?

С помощью ПЦР методики можно обнаружить практически все вирусы и инфекции. Комплексный анализ предполагает сдачу стандартного перечня именуемого в медицине группа «ИППП-12».

Состав комплекса ИППП-12

ИППП-12 может применяться при целом комплексе инфекций, в который входят:

1. Уреаплазмоз. Обычно протекает бессимптомно, но может стать причиной выкидыша, поэтому требует незамедлительного лечения при планировании беременности.
2. Микоплазмоз. Наиболее распространённые симптомы: боли в паху (усиливаются при половом акте), жжение при мочеиспускании, выделения. Мужчины являются носителями.
3. Хламидиоз. Хламидии опасны тем, что поражают уретру, кишечник и шейку матки. При отсутствии надлежащей терапии приводят к бесплодию у женщин.
4. Трихомонада. К наиболее частым симптомам относятся: покраснение и отёк половых органов, обильные выделения с резким неприятным запахом, небольшие язвочки на гениталиях. У мужчин заражение всего проходит бессимптомно, но может появляться жжение при мочеиспускании. Наряду с этой инфекцией, врачи могут выявить у женщин ещё такое заболевание, как трихомонадный кольпит. При отсутствии надлежащего лечения поражаются матка, яичники и мочевой пузырь.
5. Кандидоз (молочница). Самые распространённые симптомы: зуд и обильные творожистые выделения.
6. ВПЧ (вирус папилломы человека) 16 и ВПЧ 18. Различают бессимптомные (дисплазия) и клинически ярко выраженные варианты заболевания (кондиломы, папилломы и бородавки). Большинство из них безопасные. Но необходимо постоянно наблюдаться у гинеколога. Самым опасным осложнением является онкология.
7. Цитомегаловирус. Чаще всего протекает бессимптомно. Но может проявляться в виде обычной ОРВИ.
8. Генитальный герпес тип 1 и тип 2. На половых губах появляется небольшое красноватое пятнышко, которое вызывает чувство жжения и зуда. Затем надувается пузырёк и нарастают болевые ощущения. Через 3–5 дней волдырь лопается и вытекает жидкость. На месте ранки образуются корочки. На десятый день все симптомы полностью исчезают.
9. Гонорея. Возбудителем которой является нейссерия. Симптомы: сильные боли внизу живота, жжение и дискомфорт при мочеиспускании, выделения желтовато-белого цвета с резким неприятным запахом.
10. Гарднереллёз (бактериальный вагиноз). Симптоматика схожа с молочницей.
11. Сифилис и нейросифилис (по симптоматике похож на менингит).
12. ВИЧ (СПИД).

Виды анализов на ЗППП

При проведении лабораторных исследований устанавливается точный диагноз и назначается терапия, направленная именно на устранение выявленных возбудителей.

Наиболее эффективными методами считаются:

• анализ крови;
• анализ мочи;
• соскоб из уретры и цервикального канала;
• исследование спермы;
• анализ секрета простаты.

Анализ крови

Анализ крови на ИППП выполняется методом прямой и непрямой иммунной флюоресценции. Материал окрашивают особыми антителами в сочетании с красителями.

Например, достоверность подобного исследования достигает при выявлении:

Можно выделить следующие исследования:

• анализ крови на TORCH инфекции: токсоплазмоз, краснуха и цитомегаловирус;
• RW – реакция Вассермана (применяется для выявления сифилиса);
• ВИЧ-инфекции, гепатиты B и C.

Анализ мочи

С помощью общего анализа мочи диагностируется воспалительный процесс в мочеполовой системе, а также наличие инфекции.

Для ПЦР мочу сдают в основном мужчины. Единственным и главным недостатком такого метода обследования является то, что можно установить лишь сам факт наличия бактерий, но невозможно определить их количество.

Соскоб из уретры и цервикального канала

Эта диагностика является наиболее эффективной для определения ИППП. Методика совершенно безопасная и безболезненная. Мазок позволяет обнаружить как наличие вредных микроорганизмов, так и их количество.

Забор проводится следующим способом: врач соскабливает материал из уретры и цервикального канала (только у женщин) с помощью специальных инструментов.

Сперма и секрет простаты

Метод диагностики предназначен для обнаружения в биоматериале:

• специфических фрагментов ДНК основных возбудителей инфекций, которые могут передаваться половым путём;
• урогенитальных инфекций мочеполовой системы у мужчин (к ним относятся: гонорея, хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз).

Главным преимуществом диагностики является установление не только наличия возбудителей, но и определение точного их количества.

Семенную жидкость пациент собирает самостоятельно в контейнер. Секрет простаты собирает врач после массажа предстательной железы.

Подготовка к сдаче анализа

Для получения достоверного результата ПЦР на ИППП, необходимо основательно к нему подготовиться.

Если речь идёт об анализе крови, то следует придерживаться простых правил:

1. Не рекомендуется употреблять пищу за 8–12 часов до забора.
2. Следует отказаться от вредных привычек за 24 часа до анализа.
3. Нельзя за два дня принимать антибиотики, иначе картина результата обследования будет смазана. Также следует закончить приём других лекарств за 4 недели до диагностики.

Чтобы сдать анализ мочи, необходимо следовать следующим рекомендациям:

• воздержаться от половых контактов за 1 день до обследования;
• за 4 недели до обследования следует прекратить приём антибиотиков;
• собирать биоматериал нужно самостоятельно в контейнер с утра натощак.

При подготовке к взятию мазка из уретры и цервикального канала, следует выполнять следующие рекомендации:

• за 7 дней до забора материала необходимо прекратить приём свечей, спринцеваний и спреев;
• исключить половые акты за 2–3 дня до обследования;
• вечером перед процедурой провести гигиенические процедуры, желательно без мыла;
• рекомендуется не мочиться за 2–3 часа до процедуры;
• у женщин брать мазок следует через 3 дня после менструации или за 3 дня до её начала.

Перед сдачей анализа семенной жидкости у мужчин необходимо:

• накануне провести гигиену половых органов;
• закончить приём антибиотиков за 4 недели до сдачи анализа;
• воздержаться от половых актов за 3 дня до сбора материала.

Из видео вы узнаете о методах диагностики ПЦР, а так же как подготовиться к обследованию. Снято Московским КВД.

Сроки исполнения анализов на ЗППП

Как правило, средняя продолжительность исследования материалов составляет от 1 до 3 дней. Ответы на большинство анализов, где будут расшифровывать результаты, можно получить уже в день забора. Например, анализ крови или мочи.

Расшифровка результатов

Существует только 2 варианта расшифровки результата:

1. Отрицательный ответ указывает на то, что во взятом для исследования материале не было обнаружено никаких вредоносных микроорганизмов.
2. Положительный результат ПЦР свидетельствует о наличии следов инфекции в образце. С большой вероятностью такой ответ подтверждает наличие возбудителей в данный момент.

Нельзя исключать ситуации, когда ПЦР оказывается положительной, но активной инфекции не выявлено. Это «здоровое носительство», без ярко выраженных клинических симптомов. Оно не требует специальной терапии, но необходимо проходить плановые периодические обследования по назначению врача.

Сколько стоит ПЦР на ИППП?

Стоимость ПЦР на ИПП по регионам приведена в таблице:

Регион	Стоимость	Фирма
Москва	от 350 руб.	«МедЦентрСервис»
Челябинск	от 400 руб.	Эститик Центр «Комильфо»
Краснодар	от 230 руб.	«ЗДРАВА»

Фотогалерея

Видео

Из этого видео можно узнать, что такое диагностика ПЦР на ИППП и как она проводится. Снято каналом MYVENEROLOG RU.

Источник